文献来源：《国际眼科杂志》

　　文献作者： 曹 亮  宋 愈  吴 莹  黄黎黎

    目的：观察正常和高糖条件下人参皂甙Rg3对人视网膜血管内皮细胞血管新生作用的影响。

    方法：在正常和高糖条件的培养基中,分别加入0.1 mmol/L和0.5mmol/L的人参皂甙Rg3,在24h ,48h和72h 用MTT检测细胞的增殖情况,用Transwell小室检测细胞迁徙情况,用Matrigel检测细胞管腔形成的情况,用实时定量RT-PCR和 Western-Blot 检测细胞中血管内皮生长因子mRNA和蛋白的表达情况。

    结论：通过抑制VEGF的表达,人参皂甙Rg3可抑制人视网膜血管内皮细胞增殖、迁徙和管腔形成,进而抑制新生血管的形成。

文献节选：

“ 1.2 方法

1.2.1 细胞分组

1.2.2 MTT检测细胞增殖

1.2.3 Transwell小室检测细胞移行

1.2.4 Matrigel检测内皮细胞管腔形成

1.2.5 实时荧光定量RT-PCR法

1.2.6 Western-Blot法检测VEGF蛋白质的表达
 

2 结果
2.1 人参皂甙Rg3对HRCEC细胞增殖的影响

MTT比色法结果显示,无论在正常培养基中或是高糖培养基中，均可观察到人参皂甙Rg3对于HRCEC增殖的抑制作用，且呈浓度与时间依赖性(表1)。

2.2人参皂甙Rg3对HRCEC细胞移行的影响

无论在正常培养基中或是高糖培养基中,随着人参皂甙Rg3浓度的增加,移行细胞数逐渐减少。(表2,图1)

2.3人参皂甙Rg3对HRCEC细胞管腔形成的影响

无论在正常培养基中或是高糖培养基中,随着人参皂甙Rg3浓度的增加, HRCEC细胞形成的管腔也相应减少。(表3,图2)

2.4 实时荧光定量RT-PCR 实验结果
添加人参皂甙Rg3之后,无论是正常组或是高糖组,VEGF mRNA均呈下降趋势,且呈浓度依赖性。(表4)

2.5 VEGF蛋白质的表达
添加人参皂甙Rg3之后,无论是正常组或是高糖组,VECF蛋白质表达均呈下降趋势,且呈浓度依赖性。(表5,图3)

近年来,多种细胞因子如VEGF , H1F-1和肿瘤坏死因子等在DR中的作用正越来越受到重视。新生血管的生成一般包括血管内皮基质降解、内皮细胞移行、内皮细胞增殖、内皮细胞管道化分支形成血管环和形成新的基底膜等步骤。其中的关键因子为VEGF。

无论在正常培养基中或是高糖培养基中,随着人参皂甙Rg3浓度的增加,移行细胞数逐渐减少,提示人参皂甙Rg3可以减少细胞迁徙, Shinkal等通过体外抗浸润实验表明,Rg3可以明显抑制小鼠肝癌细胞、黑色素瘤细胞、人小细胞肺癌和人胰腺癌细胞的单层浸润,推测Rg3还可以通过抑制内皮细胞的迁徙来抑制新生血管的生成。这样,人参皂甙Rg3最终表现为抑制了内皮细胞管腔的形成,并且在浓度与时间上也表现出一定的依赖性。前已述及,影响DR的细胞因子有很多,限于条件,本研究仅选取了VEGF这一关键因子作为主要指标,结果发现人参皂甙Rg3具有抑制HRCEC细胞VEGF蛋白和mRNA表达的作用。提示人参皂甙Rg3可能通过改变VECF的表达,从而在形态上影响内皮细胞成管行为。潘子明等和朱浩等2认为Rg3是通过下调肿瘤细胞VEGF mRNA及蛋白质的表达,从而抑制肿瘤新生血管的形成。”

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　　资料来源：万方数据