文献来源：《中国实验诊断学》
文献作者： 梅志宏 丁雅明 李凡 付学奇 刘林林 朱洪权
目的：探索人参皂苷Rg5对人食管癌细胞Eca-109的作用及机制。
方法：利用不同浓度人参皂苷Rg5在体外对人食管癌Eca109细胞作用不同时间，采用CCK-8法检测细胞抑制率， Annexin V-FITC/PI双染色后流式细胞仪检测细胞凋亡率，PI单染法检测细胞周期。
结论：人参皂苷Rg5能抑制食管癌Eca-109细胞增殖，其机制可能为增加细胞早期凋亡，引起细胞周期滞留。
文献节选：
“食管癌是常见的消化道肿瘤，2008年其全世界平均发病率居所有恶性肿瘤第9位;死亡率居第8位，而中国大陆食管癌发病率居全国各类恶性肿瘤第5位，死亡率高居第4位，显著高于国际平均水平。居高不下的发病率及死亡率严重威胁人类的健康。目前食管癌的治疗手段主要是手术及放化疗治疗。因其解剖位置特殊，治疗效果一般，预后较差，应用新型药物延缓其复发和转移是提高其治疗疗效的手段之一。
人参皂苷Rg5是从人参中提取的稀有人参皂苷，Rg5能诱导多种肿瘤细胞凋亡，Shin-jung Kim等人从细黑参中提取的Rg5已验证在人乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-453)、Li-dan Liang等报道Rg5能诱导多种宫颈癌细胞凋亡和DNA损伤，然而在该人参单体对食管癌细胞的作用未见报道。本研究通过体外细胞实验证实人参皂苷Rg5对食管癌细胞具有抑制增殖作用，为临床治疗肿瘤开发新型中药提供一定的实验数据。
1材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞株
该实验采用的食管癌细胞株Eca109细胞由吉林大学第二医院中心实验室保存。
1.1.2人参皂苷Rg5
该实验所用人参皂苷Rg5单体由吉林大学生命科学院从人参中分离及提供本次实验。
1.1.3主要试剂及试验耗材
RPMI-1640培养基购自Hyclone公司;胎牛血清(FBS)购自由NQBB公司;青-链霉素双抗购自Gibco公司;凋亡检测试剂盒Annexin V-FITC/PI为BD公司产品，周期检测试剂盒购自南京凯基生物公司，CCK-8为日本同仁产品。37℃恒温培养箱、酶标仪为Thermo公司设备，流式细胞仪为Beckman公司仪器。
1.2 方法
1.2.1 食管癌细胞抑制率检测
1.2.2 细胞生长状态观察
1.2.3 细胞凋亡检测
1.2.4 细胞周期检测
1.2.5 统计学分析
2.1 Rg5对细胞增殖的抑制作用
不同浓度的Rg5对Eca-109细胞作用后抑制其增殖，且随着浓度和时间的增加，其抑制率相应增加，经过SPSS软件分析，其24h的IC50为42.95μ mol/L，48h的IC50为31.61μ mol/L，我们选择近50、100μ mol/L浓度进行以下实验。如表1。
Rg5作用Eca109细胞的时间不同，其细胞抑制率不同，随时间延长其抑制率增加，以50μ mol/L浓度的Rg5观察不同时间对Eca109的抑制率，见表2。
2.2 不同浓度与Eca-109细胞作用后生长情况
镜下可见，随浓度增加，细胞形态发生明显变化，其体积变小，部分出现皱缩、变圆、脱落(图1)。
2.3 Rg5对Eca109细胞周期的影响
食管癌细胞的周期受到Rg5的影响，随着浓度的增加，其周期主要阻滞在G2/M、S期，而G0/G1比例相对减低。当以50、100mol/L浓度作用细胞24h后，其S期、G2期与对照组相比，有明显的差异性，具有统计学意义(P<0.05 )。见表3。
2.4 Rg5对Eca109细胞增殖的影响
分别用50、100μ mol/L浓度Rg5作用Eca109细胞后可见细胞凋亡率增加，且随浓度增加其早期凋亡率也增加。当以50、100μ mol/L浓度作用细胞24h后，其早期凋亡率与对照组相比，有明显的差异性，具有统计学意义(P<0.05)。见表4 。
3 讨论
肿瘤的生长是一个复杂的过程，因其不能像正常细胞一样进行程序化凋亡而进行无限增殖，因此，如何诱导肿瘤细胞凋亡或产生细胞周期滞留致使细胞停止分裂或延迟分裂，是药物治疗肿瘤的最基本的几种作用方式。
人参是祖国传统医学中重要的药物，随着医学科技的发展，其多种成分已被分离出来形成单体，其中人参皂苷Rg3，已被制成抗肿瘤中药应用于临床。 Rg5作为一种新型人参单体，目前正被用于多种研究，LeeYY等研究了Rg5在BV2小胶质细胞中的抗炎作用，Siddiqi等报道了其在小鼠成骨细胞中的刺激作用，Chu等人研究了人参皂甙Rg5通过减弱神经炎症反应改善 STZ诱导记忆受损大鼠的认知功能障碍和β-淀粉样蛋白沉积等。本实验通过体外细胞实验证明其对食管癌细胞具有增殖抑制作用，这与之前报道的 Rg5能诱导其他肿瘤细胞凋亡一致。本实验发现其抑制肿瘤细胞增殖通过影响细胞周期，主要是将细胞周期阻滞在S期和G2期，从而表现出其细胞毒作用，同时引发肿瘤细胞凋亡，并随着浓度增加，其凋亡率也相应增加。
总体说来，本次实验证实人参皂苷Rg5能在体外实验中抑制食管癌细胞增殖，为临床开发治疗食管癌新药提供一定的实验基础。”
点击蓝字查阅原文献：《人参皂苷Rg5对人食管癌细胞作用的研究》
资料来源：百度学术
